2.5. Analisis homosistein plasma dan kreatin dan GAA dalam jaringan payudara dan plasmaPenentuan HPLC konsentrasi kreatin plasma dan jaringan dan GAA dilakukan sesuai dengan metode yang dijelaskan oleh Buchberger dan Ferdig (2004) dan konsentrasi homosistein plasma mengikuti metode Vester dan Rasmussen (1991). Secara singkat, 10 g jaringan otot dipeluk, dicampur dengan 120 ml air deionisasi dan homogen dengan mixer rotor. Suspensi dicampur dengan air deionisasi dan sentrifuged, dan supernatant kemudian dikolahir. Sampel plasma dicampur secara menyeluruh dengan larutan presipitasi protein 500 ml yang terdiri dari 0,1 M ZnSO4 dalam metanol / air (30:70, v / v). Setelah sentrifugasi (4000 rpm, 10 menit), 500 ml fraksi cair mengalami ultra-filtrasi (10 filter kDa). Filtrat dari darah dan jaringan dicampur dengan 300 ml 1,3 M KOH dan 150 ml larutan ninhydrin beralkoda 0,9%. Setelah inkubasi selama 15 menit pada suhu kamar, 100 ml larutan asam askorbat 5% dan 100 ml asam fosfat 5 M ditambahkan dan campuran dipanaskan pada 90 ° C selama 30 menit. Setelah pendinginan pada suhu kamar selama 5 menit sampel dijalankan pada HPLC
正在翻譯中..