4．操作步骤4.1 样品准备4.1.1排放水样品应至少取200mL，加

4．操作步骤
4.1 样品准备
4.1.1排放水样品应至少取200mL，加入已灭过菌的5％硫代硫酸钠溶液0.75mL，使用前应充分混匀。
4.1.2根据排放水样品中粪大肠菌群数确定污水样品接种量。此排放水接种量一般为10mL、1mL、0.1mL。
4.1.3接种量少于1mL时，水样应制成稀释样品后供发酵试验使用。接种量为0.1mL时，取稀释比分别为1:10。其它接种量的稀释比依此类推。
4.1.4 1:10稀释样品的制作方法为：吸取1mL水样，注入到盛有9mL灭菌水的试管中，混匀，制成1:10稀释样品。
4.2 发酵试验
4.2.1取三个接种量、每个接种量的样品分别接种于5个试管内，共需15个试管。
4.2.2 接种量为10mL，吸取10mL样品接种于装有5mL三倍浓度乳糖胆盐培养液的试管内；接种量为1mL时，吸取1mL样品接种于装有10mL普通浓度乳糖胆盐培养液的试管内；接种量为0.1mL时，吸取1mL稀释样品接种于装有10mL普通浓度乳糖胆盐培养液的试管内。
4.2.3将接种好样品试管（内有小倒管）中，置于44℃培养24h。
4.3 平板分离
4.3.1大肠杆菌分解乳糖产酸时培养液变色、产气时小倒管内出现气泡。
4.3.2经24h培养后，将产酸的试管内培养液分别划线接种于EMB培养基上。置于37℃培养箱中，培养18～24h。
4.4 鉴定
4.4.1挑选可疑粪大肠菌群菌落，进行革兰氏染色和镜检。具体方法见（SOP-QC-302-A）
4.4.2可疑菌落有：a.深紫黑色，具有金属光泽的菌落；b.紫黑色，不带或略带金屑光泽的菌落；c.淡紫红色，中心色较深的菌落。
4.4.3涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则挑取上述典型菌落1～3个接种于盛有5mL乳糖蛋白胨培养液倒管和倒管的试管内，置于44℃培养箱中培养24h。产酸产气试管为粪大肠菌群阳性管。
5．计数
5.1根据证实有粪大肠菌群存在的阳性管数，查表A1可得100mL排放水中粪大肠菌群MPN值。
5.2 表A1是按一定的三个10倍浓度差接种量设计的（排放水接种量为10mL、1mL和0.1mL），当采用其他三个10倍浓度差接种量时，需要修正表内MPN值，具体方法如下：
表内所列排放水最大接种量增加10倍时表内MPN值相应降低10倍；排放水最大接种量减少10倍时表内MPN值相应增加10倍。如排放水接种量改为1mL、0.1mL和0.01mL时，A1表内MPN值相应增加10倍。其它的三个10倍浓度差接种量的MPN值相应类推。
5.3由于A1表内MPN值的单位为每100mL排放水样品中MPN值，而排放水以1L为报告单位，因此需将查A1表得到的MPN值乘上10，换算成1L排放水样品中的MPN值。
6．检验结果报告
根据粪大肠菌群MPN值，报告1L污水样品中粪大肠菌群MPN值。

結果 (越南文) 1:

4. Thủ tục
4.1 mẫu chuẩn bị
4.1.1 thoát nước mẫu nên thực hiện tối thiểu 200mL, đã gia nhập để chống lại vi khuẩn 0,75 mL 5% natri thiosunfat giải pháp, trộn tốt trước khi sử dụng.
4.1.2 tùy thuộc vào số lượng phân coliforms trong nước mẫu để xác định khối lượng thải mẫu tiêm chủng. Này tiêm phòng nước discharged nói chung là 10mL, 1mL, 0.1 mL.
4.1.3 ít hơn so với tiêm chủng 1mL, sau khi mẫu làm mẫu pha loãng để sử dụng trong quá trình lên men. Tiêm chủng để 0,1 mL, đưa tỷ lệ pha loãng là 1:10. Tiêm chủng khác số tiền của tỷ lệ pha loãng và như vậy. Phương pháp làm
4.1.4 pha loãng 1:10 mẫu: bài học 1mL nước mẫu,Tiêm vào ống nghiệm có chứa 9mL nước vô trùng, kết hợp tốt, thực hiện 1:10 mẫu pha loãng.
4.2 lên men
4.2.1 mất ba tiêm chủng, tiêm phòng của mỗi số mẫu hạt vào 5 ống, tương ứng, tổng cộng 15 ống nghiệm.
4.2.2 tiêm phòng 10mL hạt vào vẽ 10mL mẫu với 5mL ba lần lần nồng độ đường sữa lactoza mật muối trung bình trong ống nghiệm; tiêm phòng cho 1mL, hạt vào vẽ 1mL mẫu có chứa 10mL nồng độ của đường sữa lactoza mật muối trung bình trong ống nghiệm tiêm phòng cho 0.1 mL, bài học 1 mL pha loãng mẫu tiêm chủng trên đường sữa lactoza mật muối trung bình chứa 10 mL nồng độ trong ống nghiệm.
4.2.3 tốt tiêm phòng mẫu ống (ống nhỏ), lúc 44 ° c 24h.
4.3 tấm tách và phân hủy của
4.3.1 Escherichia coli lactose, màu sắc văn hóa Trung axit lactic, tạo ra khi các bong bóng khí trong ống nhỏ.
4.3.2 24h văn hóa, văn hóa trong ống nghiệm của sản xuất axit dash hạt thành EMB Trung, tương ứng. Đặt trong một lồng ấp 37 ° c để phát triển 18 ~ 24h.
4.4 nhận dạng
4.4.1 đáng ngờ vi khuẩn phân coliform, Gram vết và kính hiển vi. Phương pháp cụ thể xem < tiêu chuẩn thực hành cho gam nhuộm > (SOP-QC-302-A)
4.4.2 đáng ngờ thuộc địa đã: a. sâu màu tím đen, với bóng thuộc địa; sinh màu tím đen,Nếu không có tháo dỡ hoặc hơi vàng thuộc địa sáng bóng; c. nhạt mauve, màu sắc trung tâm là tương đối tối thuộc địa. Thuộc địa của
4.4.3 bôi nhọ trực khuẩn Gram âm không bạn chọn ở trên thuộc địa điển hình tiêm phòng 1 ~ 3 đầy với 5mL lactose-chế phẩm peptone trung bình ống và xuống ống ống, nằm trong vườn ươm 44 ° c 24h. Sản xuất axit khí sản xuất ống nghiệm cho phân tích cực coliform ống.
5. Count
5.1 theo xác nhận sự hiện diện của phân tích cực coliform ống, Bàn A1 100mL có sẵn trong các nước discharged phân coliform MPN giá trị.
5.2 bảng A1 là theo một thiết kế một số của ba tiêm phòng của 10 lần nồng độ gradient (tiêm phòng của nội dung discharged nước 10mL, 1mL, và các 0.1 mL), và khác 3-10 lần nồng độ gradient khi tiêm, MPN giá trị cần phải sửa chữa bảng, phương pháp cụ thể là như sau:
nước được liệt kê trong bảng khi số tiền tối đa của tiêm chủng đã tăng lên 10 lần lần MPN giá trị là 10 lần thấp trong bảng; nước tối đa tiêm phòng của MPN giá trị bởi lên đến 10 lần khi bảng tăng gấp 10 lần. Tiêm phòng của lượng discharged nước để 1mL, 0.1 mL, và 0,01 mL, các giá trị MPN tăng 10 lần trong các hình thức A1. Khác ba 10 lần gradient nồng độ của tiêm phòng của giá trị MPN và vân vân.
5.3 vì A1 bảng MPN giá trị cho phát thải mỗi 100mL MPN giá trị trong một mẫu nước và xả nước để 1L cho báo cáo đơn vị, do đó kiểm tra A1 MPN giá trị thu được cần phải được nhân với 10,Chuyển đổi 1L MPN giá trị của lượng phát thải trong nước mẫu.
6.
Theo với các bài kiểm tra kết quả báo cáo phân coliform MPN giá trị, 1L trong nước thải mẫu báo cáo giá trị MPN coliform phân.

結果 (越南文) 2:

4．操作步骤
4.1 样品准备
4.1.1排放水样品应至少取200mL，加入已灭过菌的5％硫代硫酸钠溶液0.75mL，使用前应充分混匀。
4.1.2根据排放水样品中粪大肠菌群数确定污水样品接种量。此排放水接种量一般为10mL、1mL、0.1mL。
4.1.3接种量少于1mL时，水样应制成稀释样品后供发酵试验使用。接种量为0.1mL时，取稀释比分别为1:10。其它接种量的稀释比依此类推。
4.1.4 1:10稀释样品的制作方法为：吸取1mL水样，注入到盛有9mL灭菌水的试管中，混匀，制成1:10稀释样品。
4.2 发酵试验
4.2.1取三个接种量、每个接种量的样品分别接种于5个试管内，共需15个试管。
4.2.2 接种量为10mL，吸取10mL样品接种于装有5mL三倍浓度乳糖胆盐培养液的试管内；接种量为1mL时，吸取1mL样品接种于装有10mL普通浓度乳糖胆盐培养液的试管内；接种量为0.1mL时，吸取1mL稀释样品接种于装有10mL普通浓度乳糖胆盐培养液的试管内。
4.2.3将接种好样品试管（内有小倒管）中，置于44℃培养24h。
4.3 平板分离
4.3.1大肠杆菌分解乳糖产酸时培养液变色、产气时小倒管内出现气泡。
4.3.2经24h培养后，将产酸的试管内培养液分别划线接种于EMB培养基上。置于37℃培养箱中，培养18～24h。
4.4 鉴定
4.4.1挑选可疑粪大肠菌群菌落，进行革兰氏染色和镜检。具体方法见<革兰氏染色标准操作规程>（SOP-QC-302-A）
4.4.2可疑菌落有：a.深紫黑色，具有金属光泽的菌落；b.紫黑色，不带或略带金屑光泽的菌落；c.淡紫红色，中心色较深的菌落。
4.4.3涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则挑取上述典型菌落1～3个接种于盛有5mL乳糖蛋白胨培养液倒管和倒管的试管内，置于44℃培养箱中培养24h。产酸产气试管为粪大肠菌群阳性管。
5．计数
5.1根据证实有粪大肠菌群存在的阳性管数，查表A1可得100mL排放水中粪大肠菌群MPN值。
5.2 表A1是按一定的三个10倍浓度差接种量设计的（排放水接种量为10mL、1mL和0.1mL），当采用其他三个10倍浓度差接种量时，需要修正表内MPN值，具体方法如下：
表内所列排放水最大接种量增加10倍时表内MPN值相应降低10倍；排放水最大接种量减少10倍时表内MPN值相应增加10倍。如排放水接种量改为1mL、0.1mL和0.01mL时，A1表内MPN值相应增加10倍。其它的三个10倍浓度差接种量的MPN值相应类推。
5.3由于A1表内MPN值的单位为每100mL排放水样品中MPN值，而排放水以1L为报告单位，因此需将查A1表得到的MPN值乘上10，换算成1L排放水样品中的MPN值。
6．检验结果报告
根据粪大肠菌群MPN值，报告1L污水样品中粪大肠菌群MPN值。